细胞培养使用的器材品种较多,由于离体细胞对各种毒物都很敏感,所以对细胞培养所用的
一次性细胞培养瓶清洗、消毒处理是培养能否成功的关键之一。
对于细胞培养瓶的清洗步骤可主要分为浸泡→刷洗→浸酸→冲洗这四步进行。
1.浸泡
新购的培养瓶常带有灰尘,呈弱碱性,或带有铅、碑等有害物质,故先用自来水浸泡过夜、水洗,然后再用2%-5%盐酸浸泡过夜或煮沸30min,水洗。培养瓶要立即泡入清水中,使下道刷洗工作能顺利进行。用后的培养瓶常带有大量的蛋白质附着,干涸后不易刷洗掉,用后要立即用清水浸泡。
2.刷洗
用软毛刷、优质洗涤剂,刷去培养瓶上的杂质,冲洗晾干。浸泡后的培养瓶用毛刷沾洗涤剂去除杂质、刷洗次太多,会损害培养瓶的表面光洁度,洗涤剂有使pH上升的趋势,所以易选用软毛刷和优质洗涤剂。禁止用去污粉。因其中含有砂粒。会严重破坏培养瓶的光洁度。特别注意刷洗瓶角部位。酸浸之前要把洗涤剂冲干净。
3.浸酸
将培养瓶浸泡于清洁液24h,如急用也不得少于4h。清洁液由重铬酸钾、浓硫酸及蒸馏水配制而成,具有很强的氧化作用,去污能力很强。经清洁液浸泡后,培养瓶残留的未刷洗掉的微量杂质可被完全清除。
4.冲洗
先用自来水充分冲洗,吸管等冲流10min,瓶皿需每瓶灌满、倒掉,反复10次以上。然后再经蒸馏水漂洗3次,不留死角。晾干或烘干备用。对已用过的培养瓶,凡污染者必先经煮沸30min或放3%盐酸中浸泡过夜,未污染者可不需灭菌处理,但仍要刷洗、清洁液浸酸过夜,冲洗等。